华昌化工 新研博美试剂背景介绍:PC-Biotin-PEG3-Val(C13,N15)-p
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PC-生物素-三聚乙二醇-Val(C13,N15)-炔 用于富集和纯化含叠氮基团...

新研博美试剂背景介绍:

PC-Biotin-PEG3-Val(C13,N15)-propargyl 是一款集光控裂解(PC)、生物素富集、点击化学(Click Chemistry)及稳定同位素标记(SILAC-like)于一体的高阶多功能化学交联剂。它并非直接用于成像的荧光探针,而是主要用于蛋白质组学和化学生物学研究中的靶点垂钓与定量分析。

化学本质:这是一个由五个功能模块串联而成的“全功能”小分子工具:

PC (Photocleavable):光裂解基团,在 365 nm UV 照射下可断裂,实现温和洗脱。

Biotin:亲和标签,用于链霉亲和素磁珠的强力捕获。

PEG3:三聚乙二醇柔性间隔臂,增加水溶性并减少空间位阻。

Val(C13, N15):稳定同位素标记的缬氨酸(5个碳原子为 ¹³C,1个氮原子为 ¹⁵N),提供质谱中的质量位移(+6 Da),用于精确定量。

Propargyl (Alkyne):端炔基团,用于铜催化的叠氮-炔环加成反应(CuAAC),连接含叠氮(N₃)的目标分子。

分子量:约 886 Da(因同位素标记,比普通版重约 6 Da)。

技术优势与特点

“捕获-释放”可控流程

相比传统不可逆的生物素标记,该分子支持光控释放。在完成磁珠富集后,通过紫外光照射即可切断PC键,将靶标从固相载体上温和洗脱,避免使用强酸或高温,极大提高了蛋白回收率并减少了非特异性背景。

质谱定量“双通道”

得益于 Val(C13, N15) 的稳定同位素标记,它可作为内标。实验组使用普通轻链探针,对照组使用此重链探针,混合上样后,质谱可清晰区分轻重肽段对,实现SILAC-like的绝对/相对定量,特别适合药物靶点鉴定(Target Deconvolution)。

模块化兼容性

PEG3 间隔臂提供了良好的水溶性和生物相容性。Propargyl 端基与叠氮化物的点击化学反应效率高、条件温和,可在细胞裂解液或活细胞(需注意铜毒性)中实现特异性标记。

技术原理

该试剂的核心技术原理是将“点击化学”(Click Chemistry)与“光控释放”(Photocleavage)技术相结合:

点击化学连接:首先通过炔基与目标分子上的叠氮基团进行点击化学反应,将目标分子“捕获”在该连接器上。

链霉亲和素捕获:通过生物素与链霉亲和素的亲和力,将捕获的复合物固定在固相载体上。

紫外光切割:当需要释放目标分子时,通过紫外光照射切断PC连接臂,目标分子与载体分离,实现温和、精准的释放过程。

主要应用范畴

蛋白质组学(Proteomics):用于富集和纯化含叠氮基团的标记蛋白质或肽段,通过光照切割释放并进行质谱分析。

化学探针(Chemical Probe):作为生物学研究中的探针,标记活性位点或特定相互作用的分子。

活性位点捕获(ABPP):在活性基因组学中,利用炔基探针标记靶向酶活性位点。

质谱定量:利用Val残基的同位素标记,进行相对定量分析。

小结

PC-Biotin-PEG3-Val(C13,N15)-propargyl是一种集成了光控技术、点击化学和同位素质谱标签的多功能化学试剂。其通过炔基与目标分子进行特异性捕获,并利用生物素实现高效富集,最终通过紫外光实现温和的分离释放。这种设计使其在现代蛋白质组学研究中,特别是需要精准捕获与释放的实验中,具有极高的应用价值。

新研博美信息参数:

英文名称:PC-Biotin-PEG3-Val(C13,N15)-propargyl

中文名称:PC-生物素-三聚乙二醇-Val(C13,N15)-炔

分子式:C35(13C)5H81N8(15N)O13S

分子量:885.98

外观:Light Yellow Solid

生产信息:新研博美

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注:以上试剂仅供科研使用,不可用于人类,非药用,非食用。

文章来源:小编小言

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